品牌 | 其他品牌 | 適用領域 | 科研 |
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產地 | 進口 | 加工定製 | 是 |
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美國polysciences公司成立於(yu) 1961年,主要生產(chan) 和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體(ti) 金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體(ti) 和聚體(ti) 等產(chan) 品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
轉染試劑線性PEI溶液的配製(1mg/ml)
聚乙烯亞(ya) 胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞(ya) 胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個(ge) 碳個(ge) 原子,即每“第三個(ge) 原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿"(proton sponge)體(ti) 。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒並轉染真核細胞。有實驗證明,分子量為(wei) 25000的線性PEI即Polysciences 23966轉染效率zui高。
下麵將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產(chan) 品特性及其溶液的配製過程。
1. 產(chan) 品特性:
產(chan) 品名稱:線性聚乙烯亞(ya) 胺(PEI)
CAS號 | 9002-98-6,26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n | 分子量 | 25000 |
熔點 | 73-75°C | 外觀 | 白色或黃色固體(ti) | 結構式 |
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溶解性 | 溶於(yu) 熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶於(yu) :苯,aether和丙酮 | 儲(chu) 存 | 室溫 |
2. 溶液配製
此指導說明書(shu) 是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的後編寫(xie) 的。下麵推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配製濃度為(wei) 1mg/mL的轉染試劑的配製。
材料:
1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵
配製過程:
1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解)——冷卻至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝,-20°C保存。
備注:加熱或加酸都有助於(yu) PEI溶解。當然酸可能不用加那麽(me) 多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那麽(me) 低。
試劑儲(chu) 存:
冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反複凍融。
粉末儲(chu) 存:
未開封的粉末有效期兩(liang) 年。可在室溫下保存直至使用。