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品牌 | 其他品牌 | 適用領域 | 科研 |
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產地 | 進口 | 加工定製 | 是 |
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PEI是曆shishang繼多聚賴氨酸之後發現的第二種聚合物轉染試劑。PEI能將DNA縮合成帶正電荷的微粒,這些微粒可以黏合到帶有負電荷的細胞表麵殘基,並通過胞吞作用進入細胞。一旦進入細胞,胺的質子化導致反離子大量湧入以及滲透勢降低。上述變化導致的滲透膨脹使囊泡釋放聚合物與(yu) DNA形成的複合物(polyplex)進入細胞質。複合物拆解後,DNA就能自由的融合到細胞核中。聚Ethylene亞(ya) 胺(Polyethylenimine,PEI)是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個(ge) 碳個(ge) 原子,即每第三個(ge) 原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的質子海綿(proton sponge)體(ti) 。
貨號 | 產(chan) 品名稱 | 品牌 | 規格 | 備貨情況 |
23966-1 | Polyethylenimine, Linear(MW25,000) | polysciences | 1G | 現貨 |
24765-1 | Polyethylenimine Max (Mw 40,000) | polysciences | 1G | 現貨 |
轉染試劑線性PEI MAX溶液的配製
線性聚乙烯亞(ya) 胺鹽酸鹽(Linear Polyethylenimine Hydrochloride)是線性化聚乙烯亞(ya) 胺PEI 25,000的升級產(chan) 品,是一種功能更為(wei) 強大的高效瞬時轉染試劑。與(yu) PEI 25000的區別在於(yu) :1)*水解(去乙酰化)2)PEI 25000的鹽酸鹽形式,具更高的水溶特性 3)含更長連續性乙烯亞(ya) 胺片段,其質子化氮水平比PEI25000提高11%以上。
另PEI MAX 40K比PEI 25K更易於(yu) 使用,並且更高效。PEI 25K轉染溶液通常需要幾個(ge) 小時才能製備,而PEI MAX 40K可以在兩(liang) 個(ge) 小時內(nei) 轉化為(wei) 即用型溶液。而且PEI 25K含有4-11%的殘餘(yu) 丙酰基,可防止聚合物主鏈與(yu) DNA強烈結合。PEI MAX 40K*去乙酰化的結構意味著每批產(chan) 品的表現始終如一。
下麵將主要介紹polysciences 線性PEI MAX(#24765)的產(chan) 品特性及其溶液的配製過程。
1.產(chan) 品特性:
產(chan) 品名稱:轉染級線性聚乙烯亞(ya) 胺鹽酸鹽(PEI MAX)(Linear Polyethylenimine Hydrochloride)
CAS號 | 49553-93-7 | 分子式 | (C2H5N)n ● xHCl | 分子量 | 40000 |
外觀 | 白色或灰白色自由流動固體(ti) | 儲(chu) 存 | 室溫 | 結構式 |
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溶解性 | 溶於(yu) 低溫和室溫水;不溶於(yu) 常用有機溶劑(yichun,丙T,4氫呋喃) |
2.溶液配製
此指導說明書(shu) 是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的後編寫(xie) 的。下麵推薦一種簡單適用而高效的方法,講述如何配製濃度為(wei) 1mg/mL的轉染試劑的配製。
材料:
1g #24765、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物級水)、1N OH化鈉、25mL無菌塑料吸管、一次性0.1µm, 0.2µm, 0.22µm PES真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、pH計、移液器、磁力攪拌棒、帶油管的真空泵
配製過程:
1g #24765——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加1N NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消毒——分裝,4°C保存。
備注:加熱或加酸都有助於(yu) PEI溶解。#24765比#23966易溶,可適當少量加酸,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那麽(me) 低。